Pruebas cuantitativas de NT-proBNP en la clínica

El péptido natriurético tipo B (BNP) es una hormona cardíaca de 32 aminoácidos que los miocitos y fibroblastos cardíacos secretan a la circulación en respuesta al estrés del miocardio o al estiramiento de las paredes del corazón debido al aumento del volumen y la presión. Su producción se incrementa significativamente en la insuficiencia cardíaca. El BNP se secreta como una prohormona, proBNP, que luego se escinde en la hormona biológicamente activa, BNP, y en el extremo amino no activo, NT-proBNP (76 aminoácidos). Por lo tanto, la concentración de cualquiera de estos péptidos puede usarse para evaluar la magnitud del estrés o estiramiento de la pared miocárdica. El NT-proBNP es más estable y tiene una vida media más prolongada que la prohormona y el BNP, lo que lo convierte en un útil analito de diagnóstico. Un nuevo analizador POC cuantitativo permite una medición rápida e in situ de NT-proBNP, minimizando el error preanalítico y reduciendo la variabilidad.

 

Nuestro objetivo fue validar analíticamente un ensayo de NT-proBNP (Vcheck) de acuerdo con las especificaciones de la Sociedad Estadounidense de Patología Clínica Veterinaria (ASVCP) y las Enmiendas de Mejora del Laboratorio Clínico (CLIA).

 

 

Precisión y LOQ

 

La imprecisión varió entre las concentraciones, con el coeficiente de variación (CV) más bajo en la concentración más alta, como se esperaba. La imprecisión se consideró aceptable, con un coeficiente de variación que oscilaba entre el 9% a 4000 pmol/L y el 20% a 600 pmol/L. Se verificó el rendimiento de precisión de Vcheck y se consideró que el rendimiento era aceptable para un inmunoensayo.

 

Exactitud

 

La comparación del ensayo Vcheck con el ensayo Cardiopet NT-proBNP reveló una excelente correlación con un sesgo mínimo cuando se controlaron los factores preanaliticos. La ecuación lineal fue y=0,9x+37 con intervalos de confianza (IC) del 95% y una pendiente de 0,75-1,05 y una intersección de -150 a 224.

 

Cuando se trataron 61 muestras en un entorno clínico real (enviadas por correo y analizadas según lo recomendado por el fabricante), la R cayó a 0,8 y generó una ecuación lineal significativamente diferente, y=0,7x-52.

 

 

Diagnósticos precisos para una atención mejorada, analizador Vcheck

 

 

Error preanalítico

 

Se produjo una degradación significativa de NT-proBNP cuando se utilizaron los métodos actuales a temperatura ambiente y refrigerada, lo que podría cambiar la toma de decisiones de diagnóstico y pronóstico. Se documentó una pérdida aproximada del 20% de la concentración media original en un período de 14 horas cuando se almacenaron 10 muestras a 4°C, con muestras que oscilaron entre el 16% y el 33% de pérdida durante este período de tiempo. Cuando 10 muestras se dejaron a propósito a temperatura ambiente (20°C) durante la noche, la medición al día siguiente reveló que todas las muestras habían perdido al menos el 50% de su concentración.

 

Especificidad analítica

 

La adición de 10 muestras en el rango lineal del ensayo con 35 mg/dL de hemoglobina y 1000 mg/dL de Intralipid no reveló una diferencia estadísticamente significativa usando pruebas t pareadas para los valores informados más allá del error total conocido (P>0,05).

 

Intervalos de referencia

 

Los intervalos de referencia particionados por edad (95%) tienen límites de referencia superiores de 750 pmol/L y 1280 pmol/L para 36 perros jóvenes (0-18 meses) y 125 perros adultos (19 meses hasta la edad geriátrica), respectivamente.